| チャレンジ名 | 特徴 | トレジャー ルーム |
ボス | アンロック |
| ○Dark was the Night | ダンジョンマップが表示されない状態でゲームをクリアする。 | あり | ママ | The Candle |
| ○7 Years Bad Luck | ラックパラメータが最低の状態で開始します。 ・呪い部屋の確率が上がる |
少ない | ママ | Lucky Toe |
| ○Large Marge | ・ダンジョンの広さが広い ・ボス部屋が２部屋連続で発生し、２部屋目に次フロアへの穴がある。 |
2個ずつ | ママ | Guppy's Tail |
| ○9 Deaths | ・Dead Catを所持した状態(ハート１、LIFEx9)で開始します。 | あり | ママ |
Guppy's Tail |
| ○Lord of the Flies | ・Infestation とThe Mulliganを所持した状態で開始。 (２つのアイテムの効果でダメージを与えても、被ダメしてもハエが生まれる。） |
なし | ママの心臓 | Fish Head |
| ○The Doctor's Revenge! | ・the Dr. Fetusを所持した状態で開始。 (ナミダの代わりに爆弾を発射できる。) |
なし | ママの心臓 | Epic Fetus |
| ○Meat 4 Evar! | ・レベル4Cube Meatを所持した状態で開始する。 | なし | ママの心臓 | SMB SuperFun |
| ○Spider Boy! | Spider's Biteとthe Mutant Spiderを所持した状態で開始。 | なし | ママの心臓 | Spider Butt |
| ○Isaac Was Good Today | Holy GrailとThe Haloを所持した状態で開始 | なし | サタン | Counterfeit Penny |
| ○The Purist | ・何もアイテムを所持せずに開始 (Diceをアンロックしていても) |
なし | アイザック | Daddy's Love |
バグ
キャラを指定されている。チャレンジでも、チャレンジ決定後画面が切り替わる前に
「esc→決定→キャラ指定」を素早く行えばisaac以外のキャラクターとアイテムでチャレンジが可能。
「esc→決定→キャラ指定」を素早く行えばisaac以外のキャラクターとアイテムでチャレンジが可能。
